<!DOCTYPE article
PUBLIC "-//NLM//DTD JATS (Z39.96) Journal Publishing DTD v1.4 20190208//EN"
       "JATS-journalpublishing1.dtd">
<article xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" xmlns:xlink="http://www.w3.org/1999/xlink" xmlns:xsi="http://www.w3.org/2001/XMLSchema-instance" article-type="research-article" dtd-version="1.4" xml:lang="en">
 <front>
  <journal-meta>
   <journal-id journal-id-type="publisher-id">Food Processing: Techniques and Technology</journal-id>
   <journal-title-group>
    <journal-title xml:lang="en">Food Processing: Techniques and Technology</journal-title>
    <trans-title-group xml:lang="ru">
     <trans-title>Техника и технология пищевых производств</trans-title>
    </trans-title-group>
   </journal-title-group>
   <issn publication-format="print">2074-9414</issn>
   <issn publication-format="online">2313-1748</issn>
  </journal-meta>
  <article-meta>
   <article-id pub-id-type="publisher-id">55571</article-id>
   <article-id pub-id-type="doi">10.21603/2074-9414-2022-4-2394</article-id>
   <article-categories>
    <subj-group subj-group-type="toc-heading" xml:lang="ru">
     <subject>ОРИГИНАЛЬНАЯ СТАТЬЯ</subject>
    </subj-group>
    <subj-group subj-group-type="toc-heading" xml:lang="en">
     <subject>ORIGINAL ARTICLE</subject>
    </subj-group>
    <subj-group>
     <subject>ОРИГИНАЛЬНАЯ СТАТЬЯ</subject>
    </subj-group>
   </article-categories>
   <title-group>
    <article-title xml:lang="en">Pea and Chickpea Protein Concentrates: Quality Indicators</article-title>
    <trans-title-group xml:lang="ru">
     <trans-title>Показатели качества гороховых и нутовых белковых концентратов</trans-title>
    </trans-title-group>
   </title-group>
   <contrib-group content-type="authors">
    <contrib contrib-type="author">
     <contrib-id contrib-id-type="orcid">https://orcid.org/0000-0002-7288-8569</contrib-id>
     <name-alternatives>
      <name xml:lang="ru">
       <surname>Колпакова</surname>
       <given-names>Валентина Васильевна</given-names>
      </name>
      <name xml:lang="en">
       <surname>Kolpakova</surname>
       <given-names>Valentina V.</given-names>
      </name>
     </name-alternatives>
     <email>val-kolpakova@rambler.ru</email>
     <xref ref-type="aff" rid="aff-1"/>
    </contrib>
    <contrib contrib-type="author">
     <contrib-id contrib-id-type="orcid">https://orcid.org/0000-0002-6315-7211</contrib-id>
     <name-alternatives>
      <name xml:lang="ru">
       <surname>Уланова</surname>
       <given-names>Рузалия Владимировна</given-names>
      </name>
      <name xml:lang="en">
       <surname>Ulanova</surname>
       <given-names>Rusalia V.</given-names>
      </name>
     </name-alternatives>
     <xref ref-type="aff" rid="aff-2"/>
    </contrib>
    <contrib contrib-type="author">
     <contrib-id contrib-id-type="orcid">https://orcid.org/0000-0003-2171-0522</contrib-id>
     <name-alternatives>
      <name xml:lang="ru">
       <surname>Куликов</surname>
       <given-names>Денис Сергеевич</given-names>
      </name>
      <name xml:lang="en">
       <surname>Kulikov</surname>
       <given-names>Denis S.</given-names>
      </name>
     </name-alternatives>
     <xref ref-type="aff" rid="aff-3"/>
    </contrib>
    <contrib contrib-type="author">
     <contrib-id contrib-id-type="orcid">https://orcid.org/0000-0001-8393-9256</contrib-id>
     <name-alternatives>
      <name xml:lang="ru">
       <surname>Гулакова</surname>
       <given-names>Валентина Андреевна</given-names>
      </name>
      <name xml:lang="en">
       <surname>Gulakova</surname>
       <given-names>Valentina A.</given-names>
      </name>
     </name-alternatives>
     <xref ref-type="aff" rid="aff-4"/>
    </contrib>
    <contrib contrib-type="author">
     <contrib-id contrib-id-type="orcid">https://orcid.org/0000-0003-2320-9985</contrib-id>
     <name-alternatives>
      <name xml:lang="ru">
       <surname>Семёнов</surname>
       <given-names>Геннадий Вячеславович</given-names>
      </name>
      <name xml:lang="en">
       <surname>Semenov</surname>
       <given-names>Gennadiy V.</given-names>
      </name>
     </name-alternatives>
     <xref ref-type="aff" rid="aff-5"/>
    </contrib>
    <contrib contrib-type="author">
     <contrib-id contrib-id-type="orcid">https://orcid.org/0000-0002-7447-8520</contrib-id>
     <name-alternatives>
      <name xml:lang="ru">
       <surname>Шевякова</surname>
       <given-names>Людмила Владимировна</given-names>
      </name>
      <name xml:lang="en">
       <surname>Shevjakova</surname>
       <given-names>Ludmila V.</given-names>
      </name>
     </name-alternatives>
     <xref ref-type="aff" rid="aff-6"/>
    </contrib>
   </contrib-group>
   <aff-alternatives id="aff-1">
    <aff>
     <institution xml:lang="ru">ВНИИ крахмала и переработки крахмалсодержащего сырья – филиал ФГБНУ «ФИЦ картофеля имени А. Г. Лорха»</institution>
     <city>Красково</city>
     <country>Россия</country>
    </aff>
    <aff>
     <institution xml:lang="en">Russian Potato Research Centre</institution>
     <city>Kraskovo</city>
     <country>Russian Federation</country>
    </aff>
   </aff-alternatives>
   <aff-alternatives id="aff-2">
    <aff>
     <institution xml:lang="ru">Институт микробиологии им. С. Н. Виноградского ФИЦ «Фундаментальные основы биотехнологии» РАН</institution>
     <city>Москва</city>
     <country>Россия</country>
    </aff>
    <aff>
     <institution xml:lang="en">S.N. Vinogradsky Institute of Microbiology of the Federal Rese arch Center “Fundamental of Biotechnology” of the Russian Academy of Sciences</institution>
     <city>Moscow</city>
     <country>Russian Federation</country>
    </aff>
   </aff-alternatives>
   <aff-alternatives id="aff-3">
    <aff>
     <institution xml:lang="ru">ВНИИ крахмала и переработки крахмалсодержащего сырья – филиал ФГБНУ «ФИЦ картофеля имени А. Г. Лорха»</institution>
     <city>Красково</city>
     <country>Россия</country>
    </aff>
    <aff>
     <institution xml:lang="en">Russian Potato Research Centre</institution>
     <city>Kraskovo</city>
     <country>Russian Federation</country>
    </aff>
   </aff-alternatives>
   <aff-alternatives id="aff-4">
    <aff>
     <institution xml:lang="ru">ВНИИ крахмала и переработки крахмалсодержащего сырья – филиал ФГБНУ «ФИЦ картофеля имени А. Г. Лорха»</institution>
     <city>Красково</city>
     <country>Россия</country>
    </aff>
    <aff>
     <institution xml:lang="en">Russian Potato Research Centre</institution>
     <city>Kraskovo</city>
     <country>Russian Federation</country>
    </aff>
   </aff-alternatives>
   <aff-alternatives id="aff-5">
    <aff>
     <institution xml:lang="ru">Российский биотехнологический университет</institution>
     <city>Москва</city>
     <country>Россия</country>
    </aff>
    <aff>
     <institution xml:lang="en">Russian Biotechnological University</institution>
     <city>Moscow</city>
     <country>Russian Federation</country>
    </aff>
   </aff-alternatives>
   <aff-alternatives id="aff-6">
    <aff>
     <institution xml:lang="ru">Федеральный исследовательский центр питания, биотехнологии и безопасности пищи</institution>
     <city>Москва</city>
     <country>Россия</country>
    </aff>
    <aff>
     <institution xml:lang="en">Federal Research Centre of Nutrition, Biotechnology and Food Safety</institution>
     <city>Moscow</city>
     <country>Russian Federation</country>
    </aff>
   </aff-alternatives>
   <pub-date publication-format="print" date-type="pub" iso-8601-date="2022-12-21T00:00:00+03:00">
    <day>21</day>
    <month>12</month>
    <year>2022</year>
   </pub-date>
   <pub-date publication-format="electronic" date-type="pub" iso-8601-date="2022-12-21T00:00:00+03:00">
    <day>21</day>
    <month>12</month>
    <year>2022</year>
   </pub-date>
   <volume>52</volume>
   <issue>4</issue>
   <fpage>650</fpage>
   <lpage>664</lpage>
   <history>
    <date date-type="received" iso-8601-date="2022-04-07T00:00:00+03:00">
     <day>07</day>
     <month>04</month>
     <year>2022</year>
    </date>
    <date date-type="accepted" iso-8601-date="2022-06-07T00:00:00+03:00">
     <day>07</day>
     <month>06</month>
     <year>2022</year>
    </date>
   </history>
   <self-uri xlink:href="https://fptt.ru/en/issues/21089/21029/">https://fptt.ru/en/issues/21089/21029/</self-uri>
   <abstract xml:lang="ru">
    <p>Дефицит белка в питании человека и животных диктует разработку новых видов белковых препаратов, к которым относятся концентраты из зернобобовых культур. Цель работы – сравнительная характеристика показателей качества пищевых и кормовых белковых концентратов, полученных биотехнологическим и биосинтетическим способами из гороховой и нутовой муки. &#13;
Объектами исследования являлись гороховые и нутовые белковые концентраты, ферментные препараты Shearzym 500 L, Viscoferm L, Fungamyl 800 L и Alcalase 2.4 L (Дания), дрожжи Saccharomyces и микромицет Geotrichum. Белковые концентраты получали из гороховой и нутовой муки по технологии, предложенной авторами. Свойства белковых концентратов изучали с помощью химических, физико-химических, биохимических и микробиологических методов исследования. &#13;
В ходе работы получили белковые концентраты пищевого назначения и кормовые микробно-растительные концентраты. Содержание белка в нутовом белковом концентрате составило 83,22 ± 0,35 % на сухое вещество, в гороховом – 71,78 ± 0,35 % на сухое вещество. Показатель биологической ценности, с поправкой на усвояемость белков, у горохового белкового концентрата составил 96 %, у нутового – 76 %. Полученные белковые концентраты отличались по содержанию незаменимых аминокислот, меди, кобальта, марганца и никеля и количеству фенолокарбоновых кислот и их производных. Более высокая пенообразующая способность и меньшая стабильность пены у нутового концентрата соотносились с большим содержанием фенолокарбоновых кислот и их производных и количеством параллельной β-структуры и антипараллельных 310-спиралей белков. Разницы в усвоении углеводов сыворотки консорциумом дрожжей Saccharomyces и микромицета Geotrichum как из горохового, так и из нутового микробно-растительного концентрата не обнаружено. Оба вида сухой кормовой биомассы содержали 61,68–64,10 % белка на сухое вещество, биомассы с культуральной жидкостью – 47,15–51,09 % белка на сухое вещество. Биологически полноценные кормовые концентраты отличались по массовой доле жира и растворимых и нерастворимых волокон, а также по минеральным веществам и соотношению жирных кислот. Обнаружена корреляционная взаимосвязь между количеством фенолокарбоновых кислот и их производных (в мг/г белка) в сырье, концентратах, оптической плотностью водных растворов при D590 нм и цветом препаратов (R = 0,895).&#13;
Полученные и исследованные гороховые и нутовые белковые концентраты из муки могут быть рекомендованы для применения в пищевых целях, микробно-растительные концентраты из гороховой и нутовой сыворотки – в кормах для животных с целью улучшения качества сырья животного происхождения.</p>
   </abstract>
   <trans-abstract xml:lang="en">
    <p>Protein deficiency in human and animal diet demands novel protein components, e.g., various leguminous concentrates. This article compares the quality indicators of food and feed protein concentrates obtained by biotechnological and biosynthetic methods from pea and chickpea flour.&#13;
The research featured pea and chickpea protein concentrates; enzyme preparations Shearzym 500 L, Viscoferm L, Fungamyl 800 L, and Alcalase 2.4 L (Denmark); Saccharomyces and Geotrichum micromycetes yeasts. The protein concentrates were obtained from pea and chickpea flour using a new technology developed by the authors. The properties of the protein concentrates were studied by chemical, physicochemical, biochemical, and microbiological research methods.&#13;
The research resulted in new protein concentrates for human diet and microbial-vegetable feed concentrates. The protein content was 83.22 ± 0.35% on dry basis in the chickpea protein concentrate and 71.78 ± 0.35% on dry basis in the pea concentrate. The indicator of biological value, adjusted for protein digestibility, was 96% for the pea protein concentrate and 76% for the chickpea protein concentrate. The resulting protein concentrates differed in the content of essential amino acids, copper, cobalt, manganese, and nickel, as well as in phenolic acids and their derivatives. The chickpea concentrate had a greater foaming capacity and lower foam stability, which correlated with a greater content of phenolic acids, their derivatives, parallel β-structures, and antiparallel protein 310-helices. Both the concentrates had the same results in assimilating whey carbohydrates by the consortium of Saccharomyces and G. micromycete. Both types of the dry feed biomass contained 61.68–64.10% protein on dry basis, while the biomasses with culture liquid contained 47.15–51.09% protein on dry basis. The biologically complete feed concentrates differed in the mass fraction of fat, soluble and insoluble fibers, minerals, and fatty acids. The amounts of phenolic acids and their derivatives (mg/g of protein) in the raw materials and the concentrates correlated with the optical density of their aqueous solutions at D590 nm and the color of the preparations (R = 0.895).&#13;
The new pea and chickpea flour protein concentrates can be recommended as human food components, while the microbial-vegetable concentrates from pea and chickpea serum can improve the quality of raw materials of animal origin in animal feed.</p>
   </trans-abstract>
   <kwd-group xml:lang="ru">
    <kwd>Экстракция</kwd>
    <kwd>бобовые</kwd>
    <kwd>белок</kwd>
    <kwd>аминокислотный состав</kwd>
    <kwd>жирнокислотный состав</kwd>
    <kwd>макроэлементы</kwd>
    <kwd>микроэлементы</kwd>
    <kwd>функциональные свойства</kwd>
    <kwd>пищевая ценность</kwd>
    <kwd>безопасность</kwd>
   </kwd-group>
   <kwd-group xml:lang="en">
    <kwd>Extraction</kwd>
    <kwd>legumes</kwd>
    <kwd>protein</kwd>
    <kwd>amino acid composition</kwd>
    <kwd>fatty acid composition</kwd>
    <kwd>macroelements</kwd>
    <kwd>microelements</kwd>
    <kwd>functional properties</kwd>
    <kwd>nutritional value</kwd>
    <kwd>safety</kwd>
   </kwd-group>
  </article-meta>
 </front>
 <body>
  <p>ВведениеВ России и за рубежом возрос интерес к ис-пользованию в пищевых продуктах зернобобовыхкультур из-за высокой питательной ценности белкаи относительно низкой стоимости [1]. Белковыеконцентраты и изоляты используются в производствехлебобулочных и макаронных изделий, имитацион-ных молочных продуктов, творога, йогуртов, мясныханалогов, продуктов детского и спортивного питанияи т. д. Поэтому разработка новых технологий кон-центрированных форм растительного белка свысокой питательной ценностью и хорошимифункциональными свойствами является актуальнойзадачей [2].Обычно белки из растительного сырья экстраги-руют растворами щелочи, в присутствии которойвозможно образование новых поперечных кова-лентных связей, D-изомеров аминокислот и т. д.,оказывающих негативное влияние на здоровьечеловека и животных. Безопасные технологии сиспользованием ферментных препаратов для по-лучения биологически ценных гороховых и нутовыхбелков с надлежащими функциональными свойствамималоизвестны.При производстве белковых продуктов, не-зависимо от особенностей технологии и вида сырья,образуются вторичные продукты переработки –сывороточные воды. Наряду с ростом мировогоспроса на белоксодержащие продукты питания икормления из растительного сырья увеличиваютсяобъемы жидких отходов, загрязняющих окружаю-щую среду и нагружающих биосферу в целом [3].Так как одно из направлений научно-техническогоразвития мирового сообщества на предстоящиегоды – рациональное природопользование, то важ-ной проблемой является разработка экологическибезопасных технологий утилизации отходов иповышение уровня экологической культуры приглубокой переработке растительного сырья.Отходы перспективно использовать в качествесубстрата для синтеза биомассы микроорганиз-мов [2, 4–6]. Биомасса может использоваться какчасть рациона сельскохозяйственных животных дляповышения их продуктивности и как ингредиент впродуктах питания в качестве белковых, липидных,углеводных и других компонентов, а также втехнических целях [7–9].Препарат, полученный в процессе ферментациистеблей кукурузы сахаромицетами или консор-циумом сахаромицетов Lactobacillus plantarum иLactobacillus casei, положительно влиял на организмживотных и окружающую среду [10–12]. ДрожжиSaccharomyces cerevisiae, вводимые в корма кур-бройлеров в количестве 0,8 % к массе рациона,повышали эффективность их использования [13].Изучение микробиоты фекальных образцов на 21 и42 дни с помощью полимеразной реакции выявилоположительное влияние добавки с дрожжамиS. cerevisiae на микрофлору кур-бройлеров ижвачных животных и повышение усвояемостиволокон и популяции целлюлолитических бактерийRuminococcus flavefaciens рубца [14]. Добавлениев рацион крупного рогатого скота биомассыS. cerevisiae и/или Aspergillus oryzae повышало надоии жирность молока [15–17]. Известны кормовыедобавки из спиртовой барды с пшеничными от-рубями, полученные выращиванием дрожжейSaccharomyces diastaticus и каротинобразующихдрожжей Rhodosporidium species, для повышениясодержания в них незаменимых аминокислот [18].С дрожжами Rhodotorula glutinis, Rhodotorula mucilaginosaи Rhodotorula gracilis на среде изкартофельных сточных вод с отходами от произ-водства глицерина синтезирована кормовая добавкас каротиноидами и липидами [19]. На заводе, пе-рерабатывающем сахарный тростник, из винногоотхода получена грибная биомасса Aspergillus nigerс липидами для биодизельного топлива [20]. Наэкстракте, оставшимся от производства крахмалаиз зерна тритикале для кормления прудовых рыб,синтезирован микробно-растительный концентратс дрожжами S. cerevisiae с массовой долей белка25,2 ± 2,1 %, жира – 22,1 ± 3,2 %, углеводов –40,8 ± 1,6 % [21]. В концентрате содержались калий,кальций, кобальт, железо, цинк, молибден, никельи другие минеральные элементы.По данным ФАО, дефицит белка в мире оце-нивается в десятки миллионов тонн. Ежегодныйдефицит одного пищевого белка к 2050-му г. можетдостигнуть 30 млн т. [3]. В качестве источника белкав рационе людей, включая тех, которые по тем илииным причинам не употребляют мясо, с древнихвремен используются бобовые культуры и продуктыих переработки [22, 23]. В то же время процессампереработки вторичных продуктов зернобобовыхкультур, образующихся при получении белковыхконцентратов с помощью биоконверсии, уделяетсямало внимания. Например, при использовании вто-ричных продуктов от экстракции горохового белкаполучен пищевой веган-протеиновый концентратдля замены мяса. Исследования проводились с5 штаммами нитчатых грибов: Neurospora intermedia,A. oryzae, Rhizopus oryzae, Fusarium venenatumи Monascus purpureus, которые выращивали при35 ± 2 °С в течение 48 ч до содержания белка вбиомассе 43,13–59,74 % на сухое вещество. Накаждую 1 т побочного продукта можно получить около680 кг грибной биомассы с 38 % дополнительногобелка. C использованием культур S. сerevisiae иGeotrichum candidum доказана возможность синтезакормовых концентратов с массовой долей белка61,68−70,48 % из сыворотки, которая остается послеосаждения горохового белка, экстрагируемого сферментным препаратом [5].652Kolpakova V.V. et al. Food Processing: Techniques and Technology. 2022;52(4):649–664Особый интерес промышленности возрос кнуту – зернобобовой культуре, использованиекоторой позволяет создавать технологии белко-вых концентратов, изолятов и ряда других полез-ных продуктов [2]. Данная культура является пер-спективным дополнением к сое и гороху [1, 24–26].За последние годы посевные площади нута уве-личились, что свидетельствует о стабильностисырьевой базы нута и гороха в России, которая пер-спективна для производства белковых препаратовразличного состава и назначения [2]. Актуальностьпроблемы обеспечения населения белком из данноговида культур диктует разработку различныхтехнологий белковых препаратов. Поэтому созданиеспособов утилизации жидких вторичных продуктовдля перспективного внедрения в производствоявляется востребованным.Цель данной работы – сравнительная харак-теристика химических, физико-химических, био-химических и микробиологических показателейбелковых концентратов, полученных безопаснымбиотехнологическим способом для пищевых целей, икормовых концентратов, синтезированных с помощьюмикроорганизмов из сыворотки, остающейся послеэкстрагирования основной массы пищевого белкаиз гороховой и нутовой муки.Объекты и методы исследованияВ качестве объектов исследования использо-вали гороховую муку из зерна сорта «Ямал»,выращенного в Алтайском крае, и нутовую мукуиз зерна сорта «Волжанин», выращенного в Вол-гоградской области в 2020–2021 гг.Химический состав гороховой муки, % на су-хое вещество: массовая доля белка (N×6,25) –24,30 ± 1,40, золы – 2,87 ± 0,20, жира – 1,58 ± 0,12,углеводов – 73,02 ± 3,66.Химический состав нутовой муки, % на су-хое вещество: массовая доля белка (N×6,25) –24,54 ± 0,23, золы – 2,91 ± 0,02, жира – 4,89 ± 0,31,углеводов – 67,66 ± 0,56.Количество общих азотистых веществ вмуке и концентратах определяли по методуКьельдаля – ГОСТ 10846-91, массовую долювлаги – ГОСТ 13586.5-93, золы – ГОСТ 10847-2019,жира – ГОСТ 29033-91, углеводов – по разницемежду 100 % и суммой остальных компонентов.Для выделения из муки белкового концентратаи вторичного продукта (сыворотки) использовалиферментные препараты компании «Novozymes»(Дания); применяли Shearzym 500 L из Aspergillusaculeatus с ксиланазной активностью 500 ед/г иоптимальными условиями действия – 65–75 °С,рН 4,5–5,5. В качестве источника целлюлазной,карбоксиметилцеллюлазной и β-глюканазной ак-тивностей применяли Viscoferm L, продуцируемыйштаммами Trichoderma и Aspergillus, с цитолити-ческой активностью 600 ед/г сырья и оптимумомдействия при температуре 50–60 °С и рН 4,8–5,8.В качестве источника α-амилазы использовалиFungamyl 800 L из плесени Aspergillus oryzae,расщепляющий α-1,4 глюкозидные связи с об-разованием мальтодекстринов и мальтозы (50–60 °C и рН 5,0–6,5). Ферментный препарат, содержа-щий амилоглюкозидазу, AMG 300 L 2500 выделен изгриба Aspergillus niger. Он расщепляет как α-1,4, таки α-1,6 глюкозидные связи в крахмале, декстринах иолигосахаридах с образованием глюкозы. Оптимумдействия лежал в области 55–60 °С, рН 4,5–5,5. Вкачестве источника протеаз использовали ферментныйпрепарат Alcalase 2.4 L из Bacillus licheniformis сактивностью протеаз 2,4 ед/г. Ферментативнуюактивность препаратов определяли по ГОСТ P 54330-2011, ГОСТ Р 53974-2010 и ГОСТ Р 55302-2012. Всереактивы были химически чистые. УЗ-обработкубелковой суспензии проводили на аппарате Soniprep150 ME (MseLtd., Великобритания).Для получения кормовых микробно-раститель-ных концентратов (КМРК) из коллекции Институтамикробиологии им. С. Н. Виноградского (г. Москва)использовали дрожжи Saccharomyces cerevisiae 121и гриб Geotrichum candidum 977, филогенетичес-кое положение которого определено в Научно-исследовательском институте генетики. Музей-ные культуры с сусла-агара пересевали в пробиркус гороховой или нутовой сывороткой, которуюпредварительно стерилизовали под давлением0,1 МПа и охлаждали. Микроорганизмы выращивали24 ч, после чего их пересевали в колбы объемом300 см3 с 50 см3 сыворотки (рН 6,0‒6,5). Культи-вирование осуществляли на качалке при скоростивращения колб 150 мин–1 и температуре 27 ± 1 °Св течение 24‒48 ч. Суспензию инактивировалипри температуре 95 ± 5 °С в течение 10‒15 мини охлаждали до температуры 22 ± 2 °С. Биомассуотделяли центрифугированием при 4000 мин–1 втечение 10 мин, высушивали отдельно или вместес культуральной жидкостью на лиофильной установкеHochvacuum HVDTG-50 (Германия) в вакуумепри –80 °С и получали препараты КМРК-2 илиКМРК-1 соответственно.Количество белка в растворах определяли пометоду Лоури, растворимых и нерастворимых во-локон в концентратах – по методике, изложенной вруководстве [27]. Метод основан на ферментативномгидролизе крахмальных и белковых соединений самилазой, протеазой и амилоглюкозидазой до моно-,ди- и олигосахаридов и пептидов. Для гидролизабелков и углеводов использовали α-амилазу Фунгамил800 L, протеазу Alcalase 2,4 L и амилоглюкозидазуAMG от компании «Novozymes» (Дания). Растворимыепищевые волокна осаждали 4 объемами 95 % (v/v)этанола в течение 2 ч при 4 °С и промывали 2 раза95 % этанолом. Количество высушенной массы653Колпакова В. В. [и др.] Техника и технология пищевых производств. 2022. Т. 52. № 4. С. 649–664определяли гравиметрическим методом, массовуюдолю волокон выражали в процентах (г/100 г).Перевариваемость кормовых концентратов опре-деляли по ГОСТ 24230-80.Углеводный состав сыворотки и культуральнойжидкости исследовали на газовом хроматографеGCMS-QP 2010 (Shimadzu Corporation, Япония)с колонкой ReproGel Na (9 мкм, 8×300 мм). Ами-нокислотный состав белков определяли на хро-матографе L-8800 фирмы «Hitachi» (Япония) скатионообменником (сульфированный сополимерстирола с дивинилбензолом) и ступенчатым гра-диентом натрий-цитратных буферных растворов свозрастающим значением рН и молярности. Данныеобрабатывались в online системе «МультиХром 1.52»для Windows 98 (Россия). Для детекции элюируемыхаминокислот использовали нингидриновый реагент.Калибровку прибора проводили со стандартнымисмесями аминокислот после соответствующего раз-ведения. Воспроизводимость по времени выходаравнялась 0,3 %, по площади пиков – 1 %, нижняяграница чувствительности – 3 пмоль (отношениесигнал/шум = 2 для Asp). Для кислотного гидролиза3–5 мг образца помещали в стеклянную ампулу измолибденового стекла и добавляли 0,3 см3 гид-ролизующей смеси (концентрированные солянаяи трифторуксусная кислоты в соотношении 2:1с 0,1 % β-меркаптоэтанола). Образец заморажи-вали в жидком азоте, вакуумировали и заплавлялив стеклянной ампуле. Гидролиз проводили при155 °С в течение 1 ч, после чего ампулу вскрывали,содержимое переносили в пластиковую пробирку(«Eppendorf», Германия) и удаляли гидролизую-щую смесь на CentriVap Concentrator LABCONCO(США). К сухому остатку гидролизата добавляли0,1Н НСl, интенсивно перемешивали в закрытойпластиковой пробирке и центрифугировали 5 минпри 8000 мин–1 на центрифуге Microfuge 22R (Beckman-Coulter, США). При расчете аминокислотногоскора концентратов использовали шкалу эталонногобелка ФАО/ВОЗ (2011). Липиды из кормовых мик-робно-растительных концентратов выделяли по методуФолча [28]. После упаривания липидов в ротацион-ном испарителе к ним добавляли хлороформ исолянокислый метанол (SupelcoMethanolic-HCl 0,5 N)и нагревали смесь 1 ч при 90 °С. Жирнокислотныйсостав липидов исследовали на хроматографе cмасс-детектором Simadzu GCMS-QP2010 Ultra притемпературе 120 °С, инжектора – 200 °С, интерфейса –205 °С, детектора – 200 °С на колонке SLB-IL82(30 м, 0,20 мкм, d = 0,25 мм) с гелевым носителемпри скорости потока 35,6 см/с и его делении 1:10.Градиентный режим изменяли от 120 до 260 °С соскоростью 5 °С/мин в течение 2 мин.Содержание макро- и микроэлементов определялипосле сухого озоления методом атомной абсорбции наприборе фирмы «Hitachi» (модель Z 5300) в пламенивоздух – ацетилен с зеемановской коррекцией [28].Функциональные свойства белковых концент-ратов исследовали по методикам, изложеннымв работе [29], фенолокарбоновые кислоты и ихпроизводные – спектрофотометрическим методомпри поглощении света при 276 нм [30].Молекулярные массы белков муки, экстрактов,выделенных под действием ферментных препаратов, исыворотки определяли с помощью гель-электрофорезав денатурирующих условиях (SDS-ПААГ). Белковыепробы в количестве около 50 мкг смешивали сбуфером в соотношении 1:1. Для приготовлениябуфера в стакан наливали 60 см3 глицерина и1 мг бромфенолого синего, доводили рН до 6,8концентрированной HCl. В раствор добавляли5 см3 β-меркаптоэтанола и его объем доводилидо 100 см3. Пробы и растворы белков-маркеров вколичестве 102 мкг/30 мкл нагревали 2 мин при95–100 °С. Для приготовления 15 % разделяющегогеля смешивали 4,5 см3 раствора АБ (навеску 29,6 гакриламида растворяли в небольшом количествеводы, добавляли 0,4 г бисакриламида, объем дово-дили до 100 см3), 2,5 см3 трис-HCl буфера с рН 8,8,3 см3 воды, 20 мкл ТЕМЕД и 160 мкл персульфатааммония. Раствор встряхивали и заливали междустеклами. Для приготовления концентрирующегогеля смешивали 1 см3 раствора АБ, 1 см3 трис-HClбуфера c рН 6,8, 3 см3 воды, 20 мкл ТЕМЕД и160 мкл персульфата аммония. Раствор встряхивалии заливали в прибор с пластинами для электрофореза.Между стеклами помещали гребенку и формировалилунки для белковых проб. Электрофорез проводилипри напряжении 50–60 В для вхождения образцовв гель и при 120 В для разделения компонентов.Готовые электрофореграммы окрашивали ярко-синимкумасси и сканировали.Экспериментальные данные обрабатывали впрограммах TableCurve 2D 5.1, TableCurve 3D 4.0,Mathematica 10.3 и Statistica 10. Доверительныйинтервал среднего арифметического рассчитан поуровню значимости Р = 0,05.Результаты и их обсуждениеБелковые концентраты пищевого назначения.Экстракцию белков из гороховой и нутовой мукиосуществляли с гидролитическими ферментнымипрепаратами (целлюлазой, ксиланазой, амилазойи протеазой) на 3-х стадиях по схеме, приведен-ной на рисунке 1. Для определения оптимальныхпараметров экстрагирования белков составлялиматрицу планирования эксперимента из 25 опытовзависимости растворимости (R) белка от концент-рации ферментного препарата (sv), гидромодуля(соотношения мука:вода) (gl) и продолжительностиэкстракции (t). После решения задач белки в растворпереводили при оптимальных значениях параметров:для гороховой муки: sv – 1,50 %, t – 4,2 ч, g1 – 15;654Kolpakova V.V. et al. Food Processing: Techniques and Technology. 2022;52(4):649–664для нутовой муки: sv – 1,81 %, t − 5 ч, g1 – 25 прискорости перемешивания обеих суспензий 200 мин–1.Белки из раствора осаждали 10 %-ной НСl визоэлектрической точке (рН 4,2) с последующимцентрифугированием суспензии при 5000 мин–1 иотделением осадка от сыворотки. Осадок дважды про-мывали водой, высушивали лиофильным способоми получали белковые концентраты с химическимсоставом, представленным в таблице 1. Выходбелков с концентратами составлял 65–70 % от ихсодержания в сырье. Оба белковых концентратаимели значения аминокислотного скора 100 % ивыше. Исключение составил скор валина у нутовогобелкового концентрата.Рисунок 1. Технологическая схема переработки гороховой и нутово й муки на белковые концентратыFigure 1. Processing pea and chickpea flour into protein concentrates: technological schemeТаблица 1. Химический состав горохового и нутового белковых кон центратовTable 1. Pea and chickpea protein concentrates: chemical compositionМассовая доля влаги, % Массовая доля, % на сухое веществоБелок(N×6,25)Жир Зола Пищевые волокнаРастворимые НерастворимыеГороховый3,86 ± 0,20 71,78 ± 0,35 4,47 ± 0,27 1,80 ± 0,27 9,67 ± 0,76 7,57 ± 0,26Нутовый9,76 ± 0,11 83,22 ± 0,35 2,23 ± 0,31 1,11 ± 0,38 8,01 ± 0,70 5,81 ± 0,48Аминокислотный скор, %Val His Ile Leu Lys Met+Cys Thr Trp Phe+TyrГороховый110 144 166 144 145 109 160 212 183Нутовый86 120 120 111 100 100 136 184 195Гороховая/нутовая мукаВода УЗ-обработка(3 мин, 150 Вт)Фермен тация(10 ч, 50–55 °С)Ферментные препаратыЦентрифугирование(6000 мин–1)Нерастворимый остатокБелковый экстрактИзоэлектрическоеосаждениеБелковыйконцентратСыворотка Гидролиз(90–100 °С)HClПриготовлениепитательной средыЗасевмикроорганизмовФерментация(48 ч, 26–28 °С)Микробная суспензия Центрифугирование(6000 мин–1)Культураль наяжидкостьВлажнаябиомасса СушкаСушкаСушкаКРМК-1 КРМК-2655Колпакова В. В. [и др.] Техника и технология пищевых производств. 2022. Т. 52. № 4. С. 649–664Сумма незаменимых аминокислот гороховогобелкового концентрата мало отличалась от суммытаких кислот в нутовом белковом концентратеи равнялась 256,21 и 247,9 мг/100 г соответствен-но (рис. 2). С поправкой на усвояемость белков(PDCAAS) (88 %) показатель биологической ценностиу горохового белкового концентрата равен 96 %, унутового – 76 %.Состав макро- и микроэлементов белковогоконцентрата характеризовался показателями, при-веденными в таблице 2. В нутовом белковом кон-центрате массовая доля железа была в 2,1 раза ниже,чем в гороховом, цинка – в 1,4 раза ниже, меди,кобальта, марганца и никеля – в 4,8, 1,2 и 1,8 разабольше соответственно.Значения функциональных свойств (табл. 3) на-ходились на уровне значений функциональныхсвойств зерновых белковых концентратов, получен-ных из пшеницы, ячменя, ржи и риса [29, 31, 32].Гороховый концентрат, имеющий коричневый цвети содержащий в 5,5 раз больше фенолокарбоновыхкислот и их производных, по сравнению с белковымконцентратом светло-желтого цвета, имел в 2 разабольшую пенообразующую способность, в 3 разаменьшую стабильность пены и в 1,4 раза меньшуюспособность связывать воду. Жироэмульгирующаяи жиросвязывающая способности, стабильностьэмульсии и растворимость белков практически былиодинаковые у всех белковых концентратов. Нутовыйбелковый концентрат, как и гороховый белковыйконцентрат коричневого цвета, по сравнению сгороховым светло-желтого цвета, имел в 2,0–2,2 разабольше пенообразующую способность и в 2,6–3,2 разаменьшую стабильность пены. Можно сделать выводо том, что эти различия были связаны с присутствиемв белковом концентрате фенолокарбоновых кислоти их производных.В таблице 4 представлены данные по элементамвторичной структуры белков светлого порошка горохово-го и нутового белковых концентратов, полученныхна основе спектров кругового дихроизма. Измеренияпроводились в растворе 0,05 М уксусной кислоты при20 °С и концентрации белков от 0,10 до 0,16 мг/см3.Белки нутового белкового концентрата от-личались от белков горохового в 7 раз меньшимколичеством регулярной и нерегулярной α-спиралии в 2 раза меньшим количеством параллельнойβ-структуры. Однако в нутовом белковом концент-рате присутствовало в 1,26–6,0 раз больше белков сантипараллельной 310-спиралью: левозакрученной,правозакрученной и релаксированной. Скрученныеβ-изгибы и другие виды вторичной струк-туры присутствовали в одинаковых количест-вах. Следовательно, повышенная пенообразующаяТаблица 2. Содержание макро- и микроэлементовв белковых концентратахTable 2. Macro- and microelements in the protein concentratesЭлемент КонцентратыГороховый НутовыйНатрий, мг/100 г 103,00 ± 7,00 109,00 ± 7,00Калий, мг/100 г 259,00 ± 14,00 263,00 ± 15,00Кальций, мг/100 г 219,00 ± 14,00 207,00 ± 18,00Магний, мг/100 г 10,30 ± 0,70 10,70 ± 0,60Железо, мг/100 г 114,00 ± 8,00 53,90 ± 4,00Цинк, мг/100 г 3,10 ± 0,25 2,20 ± 0,20Медь, мг/100 г 0,36 ± 0,02 1,73 ± 0,05Марганец, мг/100 г 0,51 ± 0,04 0,92 ± 0,07Кобальт, мкг/100 г 92,00 ± 2,00 109,00 ± 3,00Никель, мкг/100 г 190,00 ± 16,00 340,00 ± 25,00Кадмий, мг/кг 0,086 ± 0,005 0,071 ± 0,003Хром, мг/кг ≤ 0,005 ± 0,001 ≤ 0,005 ± 0,002Молибден, мг/кг ≤ 0,040 ± 0,001 ≤ 0,040 ± 0,001Рисунок 2. Аминокислотный состав горохового и нутового белковых концентратовFigure 2. Pea and chickpea protein concentrates: amino acid composition0100020003000400050006000700080009000100001100012000AspThr Ser Glu Pro CysGly Ala ValMet Ile Leu Tyr Phe His LysArg TrpБК из гороха БК из нутамг/100 г0100020003000400050006000700080009000100001100012000AspThr Ser Glu Pro CysGly Ala ValMet Ile Leu Tyr Phe His LysArg TrpБК из гороха БК из нутамг/100 гБелковый концентрат из гороха0100020003000400050006000700080009000100001100012000AspThr Ser Glu Pro CysGly Ala ValMet Ile Leu Tyr Phe His LysArg TrpБК из гороха БК из нутамг/100 гБелковый концентрат из нута656Kolpakova V.V. et al. Food Processing: Techniques and Technology. 2022;52(4):649–664способность, но низкая величина ее стабильности, вбелковом концентрате были обусловлены параллельнойβ-структурой, всеми видами белков антипараллельной310-спирали и присутствием фенолокарбоновых кислоти их производных.Кормовые микробно-растительные концен-траты из гороховой и нутовой сыворотки.На сыворотке, остающейся после осаждения кон-центрированных гороховых и нутовых белковиз экстрактов, выделенных с помощью гидроли-тических ферментных препаратов, синтезированыкормовые белковые концентраты с консорциумомдрожжей Saccharomyces cerevisiae 121 и мик-ромицета Geotrichum сandidum 977, взятых привесовом соотношении 1:1. Составлены планыпроведения эксперимента в виде латинскихквадратов, при которых функцией являласьмассовая доля биомассы (г/дм3), факторами –рН субстрата, температура и количество посевногоматериала при росте микроорганизмов в течение4 суток. Через листинг решения определили коэф-фициенты и оптимальные значения влияющихфакторов на максимальный выход массовой долибиомассы md, г/дм3. Уравнения зависимости выходабиомассы (md) от влияющих факторов для нутовой(1) и гороховой (2) сыворотки имели вид:md = 3,798 (0,44 ++ 0,00585cm2) e–332624e-t (0,3402 + +5,5403 / pH2) (1)md = –2,94 + 0,544 pH – 0,0356 pH2 ++ 0,181 t – 0,003 t2 – 0,147 cm ++ 0,0276 cm2 – 0,00447 pH t (2)где md – массовая доля биомассы; cm – количествопосевного материала; t – температура; рН – рН среды.Коэффициенты корреляции для уравнений (1)и (2) были значимы (Р ≤ 0,05) и равнялись R = 0,9644и R = 0,9869 соответственно, что указывает наадекватное описание ими экспериментальных данных.Из уравнений вытекали оптимальные значенияфакторов, обеспечивающих максимальный выходбиомассы md = 0,82 г/дм3 для гороховой сыворотки:рН (рН) – 6,03, температура (t) – 25,7 °С, количествопосевного материала (cm) – 2–3 %; md = 0,88 г/дм3 длянутовой сыворотки: pH (рН) – 5,0, температура (t) –16,96 °С, количество посевного материала (cm) – 4,0 %.Таблица 4. Элементы вторичной структуры белков горохового и нут ового белковых концентратов, % от суммыструктурTable 4. Secondary structure of proteins in the pea and chickpe a protein concentrates, % of total structuresГороховый белковый концентрат светло-желтого цвета Нутовый белковый концентрат кремового цветаα-спираль – 7,2 ± 0,3 Регулярная – 3,0 ± 0,1 α-спираль – 0,100 ± 0,005 Регулярная – 0,1 ± 0,0Нерегулярная – 4,2 ± 0,2 Нерегулярная – 0Антипараллельная310 -спираль – 26,9 ± 0,5Левозакрученная – 0,8 ± 0,1 Антипараллельная310-спираль – 39,2Левозакрученная – 4,7 ± 0,1Релаксированная – 12,6 ± 0,4 Релаксированная – 17,6 ± 0,4Правозакрученная – 13,4 ± 0,5 Правозакрученная – 16,9 ± 0,5Параллельная β-структура – 7,1 ± 0,3 Параллельная β-структура – 3,0 ± 0,2Cвернутые β-изгибы – 14,5 ± 0,6 Cвернутые β-изгибы – 14,8 ± 0,7Другие – 44,3 ± 0,7 Другие – 42,9 ± 0,6Таблица 3. Функциональные свойства и количество фенолокарбоновы х кислот и их производных в белковомконцентратеTable 3. Functional properties and phenolic profile of the protein concentratesПоказатель Образец белкового концентратаГороховыйсветло-желтого цветаГороховыйкоричневого цветаНутовыйкремового цветаВодосвязывающая способность, г/г 2,79 ± 0,04 2,44 ± 0,03 2,82 ± 0,05Пенообразующая способность, % 42 ± 1 91 ± 1 85 ± 0Стабильность пены, % 32 ± 1 10 ± 1 12 ± 0Жиросвязывающая способность, г/г 2,24 ± 0,01 2,25 ± 0,03 2,26 ± 0,03Жироэмульгирующаяспособность, %52 ± 2 56 ± 3 55 ± 1Стабильность эмульсии, % 47 ± 9 51 ± 3 52 ± 1Растворимость в воде, % 11,60 ± 0,25 13,10 ± 0,15 12,20 ± 0,50Фенолокарбоновые кислотыи их производные, мг/г белка2,78 ± 0,24 15,05 ± 0,71 14,06 ± 0,41657Колпакова В. В. [и др.] Техника и технология пищевых производств. 2022. Т. 52. № 4. С. 649–664В процессе синтеза биомассы из обоих видовсыворотки микроорганизмы полностью усваивалиглюкозу, большую часть ксилозы, арабинозы,галактозы и фруктозы. В сумме их количествоуменьшилось более чем в 10 раз (табл. 5). Раффиноза,стахиоза и мальтоза практически не усваивались,появление сахарозы в культуральной жидкостисвязано с гидролизом в раффинозе α-1→6-гликозид-ной связи между остатками галактозы и сахарозы.Количество высокомолекулярных соединений вжидкости увеличивалось из-за количественногоперераспределения фракций.Эффективное накопление биомассы происходи-ло благодаря присутствию в сыворотке, по сравне-нию с исходной мукой, не только углеводов, нои относительно низкомолекулярных азотистыхкомпонентов. Молекулярную массу компонентовопределяли электрофорезом в полиакриламидномгеле с SDS с применением меркаптоэтанола ибез него для разрыва дисульфидных связей вбелках. Если в муке присутствовали многоцепо-чечные компоненты с молекулярной массой от15 до &gt; 250 кДа, под действием меркаптоэтанолараспадающиеся на одноцепочечные полипептиды смолекулярной массой от 10 до 150 кДа, то сывороткасодержала компоненты с более низкой молекулярноймассой: от 10 до 25 кДа (рис. 3).Углеводный и белковый составы питательнойсреды на вторые сутки роста (24 ч) микроорганиз-мов на сыворотке обеспечивали формированиеконсорциума из дрожжей и микромицета, поло-жительно влияющего на морфологию клеток (рис. 4) ина химический состав готовых кормовых микробно-растительных концентратов (табл. 6).Массовая доля белка и жира в КМРК-2 из био-массы больше на 20–36 и 4–6 % соответственно,Таблица 5. Углеводный состав сыворотки и культуральной жидкости в процессе роста биомассыTable 5. Carbohydrate composition of serum and culture liquid during biomass growthРостмикроорганизмов,суткиУглеводный состав сыворотки и культуральной жидкости, % от общего количестваВысокомолекулярныесоединенияРаффиноза,стахиозаСахароза Мальтоза Глюкоза Ксилоза,галактозаАрабиноза,фруктозаСыворотка29,75 ± 0,43 17,65 ± 1,20 0 4,75 ± 2,30 2,29 ± 1,20 39,07 ± 1,60 6,49 ± 0,20Культуральная жидкость в процессе роста микроорганизмов1 57,56 ± 0,10 26,00 ± 0,81 4,73 ± 0,12 8,21 ± 0,07 0 0 3,51 ± 0,412 53,78 ± 0,09 33,30 ± 0,70 0,20 ± 0,03 8,07 ± 0,06 0 4,86 ± 0,133 55,88 ± 0,08 28,28 ± 1,20 3,05 ± 0,21 7,79 ± 0,08 0 5,02 ± 0,054 58,47 ± 1,10 27,04 ± 0,92 0,25 ± 0,08 10,05 ± 0,10 0 4,45 ± 0,33Рисунок 3. Белковые компоненты в полиакриламидном геле: a – гор оховая сыворотка; b – нутовая сыворотка.Без меркаптоэтанола: 1 – мука; 3 – экстракт 1-ой стадии; 5 – ма ркеры; 6 – сыворотка. С меркаптоэтанолом:2 – мука; 4 – экстракт 1-ой стадии; 7 – сывороткаFigure 3. Protein components according to Polyacrylamide Gel El ectrophoresis: a – pea serum; b – chickpea serum. Withoutmercaptoethanol: 1 – flour; 3 – extract of stage 1; 5 – markers; 6 – serum. With mercaptoethanol: 2 – flour; 4 – extract of stage 1;7 – serum1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 4 5 6 7a b658Kolpakova V.V. et al. Food Processing: Techniques and Technology. 2022;52(4):649–664чем массовая доля этих соединений в кормовыхмикробно-растительных концентратах из биомассыс культуральной жидкостью (КМРК-1). Суммарастворимых и нерастворимых волокон меньше в1,4–2,0 раза. Различия в химическом составе выявленыи для кормовых микробно-растительных концентратов,полученных на различной сыворотке. Отличияв массовой доле белка составили 5–8 %. В обоихвидах нутовых кормовых микробно-растительныхконцентратов на 15–29 % больше жира и на 20–45 %больше растворимых волокон, чем в гороховых.Массовая доля нерастворимых волокон была почтиодинаковой в гороховом и нутовом КМРК-1, тогдакак в КМРК-2 из гороховой биомассы их количествобыло на 66,5 % больше, чем в КМРК-2 из нутовойсыворотки. Большему содержанию нераствори-мых волокон у горохового КМРК-2 (на 66 %), посравнению с нутовым КМРК-2, соответствовалонесколько меньшее значение их перевариваемостиin vitro с ферментным препаратом: 84,41 ± 0,32Таблица 6. Химический состав кормовых микробно-растительных кон центратов из биомассы с культуральнойжидкостью (КМРК-1) и без нее (КМРК-2)Table 6. Chemical composition of the microbial-vegetable feed biomass concentrates with and without cultural liquidКонцентрат Влажность, % Массовая доля, % на сухое вещество Пищевые волокнаБелок (N×6,25) Зола Жир Растворимые НерастворимыеКормовой микробно-растительный концентрат из нутовой сывороткиКМРК-1 7,20 ± 0,26 47,15 ± 0,58 15,27 ± 0,05 2,65 ± 0,01 15,22 ± 0,64 20,31 ± 0,33КМРК 2 9,10 ± 0,50 64,10 ± 0,88 8,93 ± 0,04 9,57 ± 0,42 8,80 ± 0,72 8,60 ± 0,27Кормовой микробно-растительный концентрат из гороховой сывороткиКМРК-1 6,81 ± 0,40 51,09 ± 0,37 8,60 ± 0,03 2,04 ± 0,19 10,51 ± 0,55 20,48 ± 0,35КМРК 2 6,81 ± 0,41 61,68 ± 0,47 8,60 ± 0,04 8,31 ± 0,36 7,13 ± 0,55 14,27 ± 0,44Рисунок 4. Клетки монокультур и их консорциума: гороховая сывор отка: a – Saccharomyces cerevisiae;b – Geotrichum candidum 977; c – 48 ч роста; нутовая сыворотка: d – 24 ч роста; e – 48 ч ростаFigure 4. Cells of monocultures and their consortium. Pea serum: a – Saccharomyces cerevisiae; b – Geotrichum candidum 977; c – 48 hof growth; chickpea serum: d – 24 h of growth; e – 48 h of growtha b c d eРисунок 5. Аминокислотный состав КМРК-2 из биомассыFigure 5. Amino acid composition of the microbial-vegetable feed concentrates with cultural liquid02004006008001000120014001600AspThr Ser Glu ProCysGly AlaValMet Ile LeuTyr Phe His LysArgTrpНутовый КМРК-2 Гороховый КМРК-2мг/100 г659Колпакова В. В. [и др.] Техника и технология пищевых производств. 2022. Т. 52. № 4. С. 649–664Таблица 7. Аминокислотный скор КМРК-2 из гороховой и нутовой сы вороткиTable 7. Amino acid score of the microbial-vegetable feed concentrates with cultural liquidКормовой микробно-растительный концентратСкор незаменимых аминокислот, %Val His Ile Leu Lys Met+Cys Thr Trp Phe+TyrКМРК-2 из гороховой сыворотки 107 219 124 107 116 226 179 247 197КМРК-2 из нутовой сыворотки 151 188 197 136 127 225 221 137 135Таблица 8. Жирнокислотный состав кормового микробно-растительно го концентрата из гороховой и нутовойсывороткиTable 8. Microbial-vegetable feed concentrate from pea and chickpea serum: fatty acid compositionКислота Массовая доля, % Кислота Массовая доля, %Гороховая Нутовая Гороховая НутоваяКаприновая (декановая) кислота С10:0 0,10 – Гипогеиновая(7-гексадеценовая) кислота C16:1(7)0,56 –Ундекановая кислота С11:0 0,05 – Пальмитиновая(гексадекановая) кислота С16:015,03 20,09(R)-3,4 – Метиледимоксиметамфетамин C11H15NO20,17 – Пальмитолеиновая (транс-9-гексадеценовая) кислота C16:1(9)3,65 8,26Лауриновая (додекановая) кислота С12:0 0,28 – 10-гептадеценовая кислота C17:1(10) 0,63 –Азелаиновая (нонандиовая) кислотаC9H16O40,09 – Маргариновая(гептадекановая) кислота C17:00,52 –Лауриновый альдегид С12Н24О 0,05 – Линолевая (октадекадиен-9Z,12Z-овая) кислота С18:2(9,12)19,73 –1-Нонадецен С19:1(9) 0,81 – Олеиновая(9-октадеценовая) кислота С18:1(9)40,43 16,5610-Метилдодекановая кислота С13Н26О2 0,05 – Петрозелиновая(6-октадеценовая) кислота С18:1(6)4,31 1,01Дифенолкетон (С6H5)2CO 0,08 – Стеариновая (октадекановая)кислота С18:07,10 1,823-фенил-2-бутиловый эфир пропеновойкислоты C13H16O2– – Гипогеиновая(7-гексадеценовая) кислота C16:1(7)0,56 –Миристоловая (9-тетрадеценовая)кислота С14:1(9)0,25 – Пальмитолеиновая (транс-9-гексадеценовая) кислота C16:1(9)3,65 –Миристиновая (тетрадекановая)кислота С14:01,36 1,35 Пальмитиновая(гексадекановая) кислота С16:0– –Пентадекановая кислота C15:0 0,45 2,14 10-гептадеценовая кислота C17:1(10) 0,63 –н-Гексиловый эфир бензойной кислотыC13H18O20,41 – Маргариновая(гептадекановая) кислота C17:00,52 –Гептиловый эфир бензойной кислотыС14H20O20,31 – Линолевая (октадекадиен-9Z,12Z-овая) кислота C18:2(9,12)19,73 41,26Диэтиловый эфир1,4-бензолдикарбоновой кислоты– 4,08 Нонадеканол-1 С19Н39ОН – 3,42против 88,46 ± 1,30 %. Различия были обусловленыособенностями химического состава зерна культур,из которых получали белковые концентраты, т. к.технология биоконверсии сыворотки была оди-наковой.Белки кормовых микробно-растительных кон-центратов содержали 18 аминокислот: глютами-новую и аспарагиновую кислоты, глицин, пролин,лизин и др. (рис. 5). Скор для всех незаменимыхаминокислот КМРК-2, полученного из биомассы,выращенной на обеих видах сыворотки, былвыше 100 % (табл. 7). Это указывает на высокуюбиологическую ценность концентратов. Однако уКМРК-2 из нутовой сыворотки скор для треонина,лизина, лейцина, изолейцина и валина был выше, чему КМРК-2 из гороховой сыворотки, и меньше длясуммы ароматических аминокислот и триптофана.Скор для серосодержащих аминокислот одинаковый.660Kolpakova V.V. et al. Food Processing: Techniques and Technology. 2022;52(4):649–664Таблица 9. Содержание макро- и микроэлементов вКМРК-1 из нутовой и гороховой сывороткиTable 9. Macro- and microelements in the microbial-vegetablefeed concentrates without cultural liquidЭлемент КМРК-1 из сывороткиНутовой ГороховойНатрий, мг/100 г 2460,00 ± 172,00 1163,00 ± 81,00Калий, мг/100 г 3377,00 ± 200,00 1844,00 ± 100,00Кальций, мг/100 г 2010,00 ± 156,00 2000,00 ± 120,00Магний, мг/100 г 222,00 ± 10,00 121,00 ± 8,00Железо, мг/100 г 5,10 ± 0,35 6,30 ± 0,46Цинк, мг/100 г 11,40 ± 0,90 14,00 ± 1,20Медь, мг/100 г 1,50 ± 0,04 1,12 ± 0,04Марганец, мг/100 г 12,00 ± 0,56 1,56 ± 0,08Кобальт, мкг/100 г 107,00 ± 3,00 57,00 ± 2,00Никель, мкг/100 г 210,00 ± 15,00 440,00 ± 36,00Свинец, мг/кг ≤ 0,001 ≤ 0,001Кадмий, мг/кг 0,151 ± 0,007 0,171 ± 0,009Хром, мг/кг ≤ 0,005 ≤ 0,005Молибден, мг/кг ≤ 0,04 ≤ 0,04Жирнокислотный состав КМРК-1 из нутовой сы-воротки был представлен 10 компонентами, изгороховой – 30 (табл. 8). Среди них на долю жирныхкислот растительных масел и животных жиров упервого концентрата приходилось 92,5 %, на суммуэфира и спирта со свойствами ароматизаторов,эфирных масел и метаболитов – 7,50 %, у второгоконцентрата – 97,0 и 3,0 % соответственно.У нутового концентрата соотношение суммынасыщенных (25,40 %) и ненасыщенных жир-ных кислот (67,09 %) равнялось 1:2,6, содержаниеомега-6 жирных кислот (линолевой кислоты) –41,26 %, у концентрата из гороховой сыворотки –1:3 (23,5/71,67%) и 19,73 % соответственно. Со-держание цис-изомеров в концентрате – 91,1 %,транс-изомеров – 5,1 %. Таким образом, по составуи виду жирных кислот оба КМРК-1 приближалиськ пищевым маслам и жирам, но в нутовом КМРК-1 таких кислот содержалось на 4,5 % меньше, аомега-6 жирных кислот (линолевой) на 21,5 % больше.Общее количество ненасыщенных жирных кислотв гороховом кормовом микробно-растительномконцентрате было выше, чем в нутовом (соотношениенасыщенные:ненасыщенные жирные кислоты 1:3против 1:2,6).Минеральный состав КМРК-1 представлен14 макро- и микроэлементами (табл. 9). В нутовомКМРК-1 содержалось в 1,8 раз больше калия, магнияи кобальта, в 10 раз больше марганца и в 2 разабольше натрия, чем гороховом КМРК-1. Количествокальция, железа, цинка практически одинаковое вобоих препаратах.Результаты рекомендовано учитывать при сос-тавлении рецептов кормов и добавок для различныхгрупп животных в целях улучшения качества по-лучаемого от них пищевого сырья.Один из образцов белковых концентратов, по-лученных из гороховой муки (образец 1), имелтемно-коричневый цвет (рис. 6). Цвет мог бытьсвязан с реакцией меланоидинообразования междукарбонильными группами восстанавливающих сахарови аминогруппами белков и аминокислот, образованиеммеланинов при участии аминокислоты тирозин ифермента тирозиназы и окислением −ОН- группфенольных соединений.Первые две причины не получили экспери-ментального подтверждения, тогда как междуколичеством фенолокарбоновых кислот и их про-изводных в образцах с различными оттенкамицвета установлена взаимосвязь. Массовая доляфенолокарбоновых кислот и их производных в муке ибелковых концентратах, выраженная в мг/г белка,коррелировала с оттенками цвета исследуемыхобразцов, тогда как количество их % на сухоевещество и в мг/г продукта не отражало этиособенности (табл. 10).Чем меньше в муке содержалось фенолокарбоновыхкислот и их производных, тем меньше их было ив составе белкового концентрата. В БК-2 светло-желтого цвета, полученном из муки-2 с меньшим в5,6 раза их количеством, по сравнению с мукой-1,этих соединений также содержалось меньше, чемв БК-1 темно-коричневого цвета (в 5,4 раза). Такаяже зависимость была характерна и для кормовогомикробно-растительного концентрата. Кормовойконцентрат КМРК-2 светло-желтого цвета содержалв 1,7 раза меньше фенолокарбоновых кислот и ихпроизводных, по сравнению с светло-коричневымКМРК-1. Высокое содержание в нутовой мукефенолокарбоновых кислот и их производных такжесопровождалось большим их количеством в готовомБК-3 темно-желтого цвета. Величина оптическойплотности водных растворов всех исследуемыхпродуктов, измеренная при D590 нм, высоко кор-релировала с массовой долей общего количествафенолокарбоновых кислот и их производных,выраженной в мг/г белка (R = 0,895).ВыводыВыполнен сравнительный анализ качественныхпоказателей пищевых и кормовых белковых кон-центратов из зернобобовых культур, полученныхс гидролитическими ферментными препаратамис достижением растворимости белков гороха инута до 84 ± 1 % и их выходом 65–70 %. Нутовыебелковые концентраты содержали белка больше, чемгороховые: 83,22 ± 0,35 против 71,78 ± 0,35 % на сухоевещество. Но показатель биологической ценности,с поправкой на усвояемость белков (PDCAAS)(88 %), у горохового белкового концентрата был661Колпакова В. В. [и др.] Техника и технология пищевых производств. 2022. Т. 52. № 4. С. 649–664Таблица 10. Массовая доля фенолокарбоновых кислот и их производ ных в муке и белковом концентратеTable 10. Mass fraction of phenolic acids and their derivatives in the flour and protein concentrateПродукт Цвет продукта Оптическая плотность,водных растворов D590 нмМассовая доля фенолокарбоновых кислот и их производных% на сухое вещество мг/г продукта мг/г белкаГороховая мука и концентратыМука-1 Желтый 0,390 ± 0,010 1,14 ± 0,06 12,70 ± 0,78 56,00 ± 1,01БК-1 Темно-коричневый 0,080 ± 0,010 1,08 ± 0,07 11,22 ± 1,40 15,05 ± 0,56Мука-2 Светло-желтый 0,080 ± 0,000 0,02 ± 0,01 1,79 ± 0,91 9,89 ± 0,23БК-2 Светло-желтый 0,040 ± 0,010 0,02 ± 0,01 1,88 ± 1,01 2,78 ± 0,05КРМК-1 Светло-коричневый0,100 ± 0,040 1,11 ± 0,03 12,23 ± 0,21 39,14 ± 0,38КРМК-2 Светло-желтый 0,040 ± 0,030 1,12 ± 0,07 12,37 ± 2,31 2,85 ± 0,04Нутовая мука и концентратыМука-3 Желтый 0,380 ± 0,030 1,11 ± 0,08 12,24 ± 0,41 54,49 ± 0,41БК-3 Темно-желтый 0,080 ± 0,040 1,17 ± 0,08 12,84 ± 0,56 14,06 ± 0,12КРМК-3 Темно-желтый 0,085 ± 0,020 1,11 ± 0,03 12,28 ± 0,12 26,68 ± 0,53Рисунок 6. Внешний вид белкового концентрата: a – из гороховой муки 1; b – из гороховой муки 2; c – из нутовоймуки; d – кормовой микробно-растительный концентрат из нутовой мукиFigure 6. Appearance of protein concentrate: a – pea flour 1; b – pea flour 2; c – chickpea flour; d – chickpea flour microbial-vegetablefeed concentratea b c dвыше, чем у нутового: 96 и 76 % соответственно.Сумма незаменимых аминокислот выше у горо-хового белкового концентрата (256,21 мг/100 г)по сравнению с нутовым (247,9 мг/100 г). Белковыеконцентраты отличались по содержанию меди,кобальта, марганца, никеля и количеству феноло-карбоновых кислот и их производных, пено-образующей способности и элементам вторичнойструктуры белков. Большему содержанию феноло-карбоновых кислот и их производных и количествупараллельной β-структуры и антипараллельных310-спиралей в нутовом белковом концентратесоответствовала более высокая пенообразующаяспособность, но более низкая стабильность пены,по сравнению с гороховым. Скрученные β-изгибы идругие виды вторичной структуры белков не влиялина значения функциональных свойств белковыхконцентратов.В усвоении углеводов дрожжами Saccharomycescerevisiae 121 и микромицетом Geotrichum сandidum977 из разных видов сыворотки различий необнаружено. Из углеводов и белков сыворотки смолекулярной массой от 10 до 25 кДа на вторые суткироста формировался консорциум микроорганизмов смассовой долей белка 47,15–51,09 % на сухое веществов биомассе совместно с культуральной жидкостьюи 61,68–64,10 % – только в биомассе. Обнаруженыразличия у кормовых белковых концентратов избиомассы гороховой и нутовой сыворотки в массовойдоле жира, растворимых и нерастворимых волокон.Аминокислотный скор всех незаменимых аминокис-лот в концентратах из обеих видов сывороткивыше 100 %. Количество ненасыщенных жирныхкислот в гороховом КМРК-1 выше, чем в нутовомКМРК-1 (соотношение насыщенные:ненасыщенныежирные кислоты 1:3 против 1:2,6), но в нутовомКМРК-1 на 21,5 % больше омега-6 жирных кислот(линолевой), калия, магния, кобальта, марганца инатрия. Для всех видов концентратов обнаружена вы-сокая корреляционная взаимосвязь между массовойдолей фенолокарбоновых кислот и их производныхв сырье, концентратов и цветом сухих препаратов.Коэффициент корреляции R между оптическойплотностью водных растворов, измеренной при662Kolpakova V.V. et al. Food Processing: Techniques and Technology. 2022;52(4):649–664D590 нм, и массовой долей фенолокарбоновых кис-лот и их производных, выраженной в мг/г белка,равнялся 0,895.Оба вида белкового концентрата рекомендованоиспользовать в пищевых целях, кормовой микробно-растительный концентрат – в кормах для животныхс учетом особенностей их химического состава,физико-химических и биохимических показателейдля улучшения качества пищевого сырья животногоили растительного происхождения.Критерии авторстваВ. В. Колпакова руководила проектом, выполнялаобзор и анализ публикаций по теме и анализиро-вала полученные в ходе экспериментов данные.Р. В. Уланова выполняла исследования по выращи-ванию биомассы на сыворотке и анализировалаполученные данные. Д. С. Куликов выполнял ис-следования по получению белковых концентратовиз гороха и нута и определению их химическогосостава и функциональных свойств. В. А. Гулаковазанималась определением химического и углевод-ного состава концентратов. Г. В. Семёнов выполнялисследования по получению и сушке белковыхконцентратов пищевого и кормового назначения.Л. В. Шевякова анализировала химический составбелковых концентратов, включая минеральный состав.Конфликт интересовАвторы заявляют об отсутствии конфликтаинтересов.</p>
 </body>
 <back>
  <ref-list>
   <ref id="B1">
    <label>1.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Зернобобовые культуры - важный фактор устойчивого экологически ориентированного сельского хозяйства / В. И. Зотиков [и др.] // Зернобобовые и крупяные культуры. 2016. Т. 17. № 1. С. 6-13.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Zotikov VI, Naumkina TS, Sidorenko VS, Gryadunova NV, Naumkin VV. Pulses as an important factor of sustainable ecologically oriented agriculture. Legumes and Groat Crops. 2016;17(1);6-13. (In Russ.).</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B2">
    <label>2.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Kolpakova VV, Kulikov DS, Ulanova RV, Chumikina LV. Food and feed protein preparations from peas and chickpeas: Production, properties, application. Food Processing: Techniques and Technology. 2021;51(2):333-348. (In Russ.). https://doi.org/10.21603/2074-9414-2021-2-333-348.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Kolpakova VV, Kulikov DS, Ulanova RV, Chumikina LV. Food and feed protein preparations from peas and chickpeas: Production, properties, application. Food Processing: Techniques and Technology. 2021;51(2):333-348. (In Russ.). https://doi.org/10.21603/2074-9414-2021-2-333-348.</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B3">
    <label>3.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Driving commitment for nutrition within the UN Decade of Action on Nutrition. World Health Organization and Food and Agriculture Organization of the United Nations; 2018. 14 p.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Driving commitment for nutrition within the UN Decade of Action on Nutrition. World Health Organization and Food and Agriculture Organization of the United Nations; 2018. 14 p.</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B4">
    <label>4.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Биологическая переработка зерна гороха с получением пищевых и кормовых белковых концентратов / Д. С. Куликов [и др.] // Биотехнология. 2020. Т. 36. № 4. С. 49-58.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Kulikov DS, Kolpakova VV, Ulanova RV, Chumikina LV, Bessonov VV. Biological processing of pea grain and secondary starch raw materials to produce food and feed protein concentrates. Biotechnology in Russia. 2020;36(4):49-58. (In Russ.).</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B5">
    <label>5.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Souza Filho PF, Nair RB, Andersson D, Lennartsson PR, Taherzadeh MJ. Vegan mycoprotein concentrate from pea processing industry byproduct using edible filamentous fungi. Fungal Biology and Biotechnology. 2018;5(1):1-10. https://doi.org/10.1186/s40694-018-0050-9</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Souza Filho PF, Nair RB, Andersson D, Lennartsson PR, Taherzadeh MJ. Vegan mycoprotein concentrate from pea processing industry byproduct using edible filamentous fungi. Fungal Biology and Biotechnology. 2018;5(1):1-10. https://doi.org/10.1186/s40694-018-0050-9</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B6">
    <label>6.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Ulanova RV, Kulikov DS, Gulakova VA, Ahremko AG, Slozhenkina MI, Kolpakova VV. Ecological approach to the use of secondary products of pea flour and rice grain processing into protein concentrates and phytin. IOP Conference Series: Earth and Environmental Science. 2021;848(1). https://doi.org/10.1088/1755-1315/848/1/012106</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Ulanova RV, Kulikov DS, Gulakova VA, Ahremko AG, Slozhenkina MI, Kolpakova VV. Ecological approach to the use of secondary products of pea flour and rice grain processing into protein concentrates and phytin. IOP Conference Series: Earth and Environmental Science. 2021;848(1). https://doi.org/10.1088/1755-1315/848/1/012106</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B7">
    <label>7.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Xu J, Zhang M, He T, Luo H, Peng K, Huang X, et al. Application of de-lignified cellulose to enhance intracellular and extracellular lipid production from oleaginous yeast using acetic acid. Bioresource Technology. 2019;293. https://doi.org/10.1016/j.biortech.2019.122032</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Xu J, Zhang M, He T, Luo H, Peng K, Huang X, et al. Application of de-lignified cellulose to enhance intracellular and extracellular lipid production from oleaginous yeast using acetic acid. Bioresource Technology. 2019;293. https://doi.org/10.1016/j.biortech.2019.122032</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B8">
    <label>8.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Sarris D, Sampani Z, Rapti A, Papanikolaou S. Valorization of crude glycerol, residue deriving from biodiesel- production process, with the use of wild-type new isolated Yarrowia lipolytica strains: Production of metabolites with pharmaceutical and biotechnological interest. Current Pharmaceutical Biotechnology. 2019;20(10):881-894. https://doi.org/10.2174/1389201020666190211145215</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Sarris D, Sampani Z, Rapti A, Papanikolaou S. Valorization of crude glycerol, residue deriving from biodiesel- production process, with the use of wild-type new isolated Yarrowia lipolytica strains: Production of metabolites with pharmaceutical and biotechnological interest. Current Pharmaceutical Biotechnology. 2019;20(10):881-894. https://doi.org/10.2174/1389201020666190211145215</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B9">
    <label>9.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Machado WRM, Silva LG, Vanzela ESL, Del Bianchi VL. Production of carotenoids by Rhodotorula toruloides isolated from Brazilian tropical savannah. International Food Research Journal. 2019;26(4):1259-1267.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Machado WRM, Silva LG, Vanzela ESL, Del Bianchi VL. Production of carotenoids by Rhodotorula toruloides isolated from Brazilian tropical savannah. International Food Research Journal. 2019;26(4):1259-1267.</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B10">
    <label>10.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Zhou X, Ouyang Z, Zhang X, Wei Y, Tang S, Ma Z, et al. Sweet corn stalk treated with Saccharomyces cerevisiae alone or in combination with Lactobacillus plantarum: Nutritional composition, fermentation traits and aerobic stability. Animals. 2019;9(9). https://doi.org/10.3390/ani9090598</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Zhou X, Ouyang Z, Zhang X, Wei Y, Tang S, Ma Z, et al. Sweet corn stalk treated with Saccharomyces cerevisiae alone or in combination with Lactobacillus plantarum: Nutritional composition, fermentation traits and aerobic stability. Animals. 2019;9(9). https://doi.org/10.3390/ani9090598</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B11">
    <label>11.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Rychen G, Aquilina G, Azimonti G, Bampidis V, Bastos MDL, Bories G, et al. Efficacy of Saccharomyces cerevisiae NBRC 0203, Lactobacillus plantarum NBRC 3070 and Lactobacillus casei NBRC 3425 as a technological additive (silage additive) for all animal species. EFSA Journal. 2017;15(2). https://doi.org/10.2903/j.efsa.2017.4704</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Rychen G, Aquilina G, Azimonti G, Bampidis V, Bastos MDL, Bories G, et al. Efficacy of Saccharomyces cerevisiae NBRC 0203, Lactobacillus plantarum NBRC 3070 and Lactobacillus casei NBRC 3425 as a technological additive (silage additive) for all animal species. EFSA Journal. 2017;15(2). https://doi.org/10.2903/j.efsa.2017.4704</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B12">
    <label>12.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Sun Z, Wang T, Aschalew ND, Zhao W, Chen X, Zhang X-F, et al. Effects of yeast cultures with different fermentation times on the growth performance, caecal microbial community and metabolite profile of broilers. Journal of Animal Physiology and Animal Nutrition. 2020;104(1):212-223. https://doi.org/10.1111/jpn.13241</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Sun Z, Wang T, Aschalew ND, Zhao W, Chen X, Zhang X-F, et al. Effects of yeast cultures with different fermentation times on the growth performance, caecal microbial community and metabolite profile of broilers. Journal of Animal Physiology and Animal Nutrition. 2020;104(1):212-223. https://doi.org/10.1111/jpn.13241</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B13">
    <label>13.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Zhen YG, Zhao W, Chen X, Li LJ, Lee HG, Zhang XF, et al. Effects of yeast culture on broiler growth performance, nutrient digestibility and caecal microbiota. South African Journal of Animal Science. 2019;49(1):99-108. https://doi.org/10.4314/sajas.v49i1.12</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Zhen YG, Zhao W, Chen X, Li LJ, Lee HG, Zhang XF, et al. Effects of yeast culture on broiler growth performance, nutrient digestibility and caecal microbiota. South African Journal of Animal Science. 2019;49(1):99-108. https://doi.org/10.4314/sajas.v49i1.12</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B14">
    <label>14.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Sousa DO, Oliveira CA, Velasquez AV, Souza JM, Chevaux E, Mari LJ, et al. Live yeast supplementation improves rumen fibre degradation in cattle grazing tropical pastures throughout the year. Animal Feed Science and Technology. 2018;236:149-158. https://doi.org/10.1016/j.anifeedsci.2017.12.015</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Sousa DO, Oliveira CA, Velasquez AV, Souza JM, Chevaux E, Mari LJ, et al. Live yeast supplementation improves rumen fibre degradation in cattle grazing tropical pastures throughout the year. Animal Feed Science and Technology. 2018;236:149-158. https://doi.org/10.1016/j.anifeedsci.2017.12.015</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B15">
    <label>15.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Anjum MI, Javaid S, Ansar MS, Ghaffar A. Effects of yeast (Saccharomyces cerevisiae) supplementation on intake, digestibility, rumen fermentation and milk yield in Nili-Ravi buffaloes. Iranian Journal of Veterinary Research. 2018;19(2):96-100.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Anjum MI, Javaid S, Ansar MS, Ghaffar A. Effects of yeast (Saccharomyces cerevisiae) supplementation on intake, digestibility, rumen fermentation and milk yield in Nili-Ravi buffaloes. Iranian Journal of Veterinary Research. 2018;19(2):96-100.</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B16">
    <label>16.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Shakira G, Qubtia M, Ahmed I, Hasan F, Anjum MI, Imran M. Effect of indigenously isolated Saccharomyces cerevisiae probiotics on milk production, nutrient digestibility, blood chemistry and fecal microbiota in lactating dairy cows. Journal of Animal and Plant Sciences. 2018;28(2):407-420.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Shakira G, Qubtia M, Ahmed I, Hasan F, Anjum MI, Imran M. Effect of indigenously isolated Saccharomyces cerevisiae probiotics on milk production, nutrient digestibility, blood chemistry and fecal microbiota in lactating dairy cows. Journal of Animal and Plant Sciences. 2018;28(2):407-420.</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B17">
    <label>17.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Sallam SMA, Abdelmalek MLR, Kholif AE, Zahran SM, Ahmed MH, Zeweil HS, et al. The effect of Saccharomyces cerevisiae live cells and Aspergillus oryzae fermentation extract on the lactational performance of dairy cows. Animal Biotechnology. 2020;31(6):491-497. https://doi.org/10.1080/10495398.2019.1625783</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Sallam SMA, Abdelmalek MLR, Kholif AE, Zahran SM, Ahmed MH, Zeweil HS, et al. The effect of Saccharomyces cerevisiae live cells and Aspergillus oryzae fermentation extract on the lactational performance of dairy cows. Animal Biotechnology. 2020;31(6):491-497. https://doi.org/10.1080/10495398.2019.1625783</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B18">
    <label>18.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Получение биологически активных добавок на основе обогащенной дрожжевой биомассы / Е. М. Серба [и др.] // Хранение и переработка сельхозсырья. 2018. № 2. С. 74-79.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Serba EM, Sokolova EN, Fursova NA, Volkova GS, Borshheva YuA, Kurbatova EI, et al. Obtaining biologically active additives based on enriched yeast biomass. Storage and Processing of Farm Products. 2018;(2):74-79. (In Russ.).</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B19">
    <label>19.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Kot AM, Błażejak S, Kieliszek M, Gientka I, Bryś J, Reczek L, et al. Effect of exogenous stress factors on the biosynthesis of carotenoids and lipids by Rhodotorula yeast strains in media containing agro industrial waste. World Journal of Microbiology and Biotechnology. 2019;35(10). https://doi.org/10.1007/s11274-019-2732-8</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Kot AM, Błażejak S, Kieliszek M, Gientka I, Bryś J, Reczek L, et al. Effect of exogenous stress factors on the biosynthesis of carotenoids and lipids by Rhodotorula yeast strains in media containing agro industrial waste. World Journal of Microbiology and Biotechnology. 2019;35(10). https://doi.org/10.1007/s11274-019-2732-8</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B20">
    <label>20.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Chuppa Tostain G, Hoarau J, Watson M, Adelard L, Sing ASC, Caro Y, et al. Production of Aspergillus niger biomass on sugarcane distillery waste water: Physiological aspects and potential for biodiesel production. Fungal Biology and Biotechnology. 2018;5(1):1-12. https://doi.org/10.1186/s40694-018-0045-6</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Chuppa Tostain G, Hoarau J, Watson M, Adelard L, Sing ASC, Caro Y, et al. Production of Aspergillus niger biomass on sugarcane distillery waste water: Physiological aspects and potential for biodiesel production. Fungal Biology and Biotechnology. 2018;5(1):1-12. https://doi.org/10.1186/s40694-018-0045-6</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B21">
    <label>21.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Andreev NR, Kolpakova VV, Goldstein VG, Kravchenko IK, Ulanova RV, Gulakova VA, et al. Utilization of secondary tricticale processing products with production of fodder microbial-vegetative concentrate for pond fish. South of Russia: Ecology, Development. 2017;12(4):90-104. (In Russ.). https://doi.org/10.18470/1992-1098-2017-4-90-104</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Andreev NR, Kolpakova VV, Goldstein VG, Kravchenko IK, Ulanova RV, Gulakova VA, et al. Utilization of secondary tricticale processing products with production of fodder microbial-vegetative concentrate for pond fish. South of Russia: Ecology, Development. 2017;12(4):90-104. (In Russ.). https://doi.org/10.18470/1992-1098-2017-4-90-104</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B22">
    <label>22.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Barman A, Marak CM, Barman RM, Sangma CS. Nutraceutical properties of legume seeds and their impact on human health. In: Jimenez-Lopez JC, Clemente A, editors. Legume seed nutraceutical research. IntechOpen; 2019. https://doi.org/10.5772/intechopen.78799</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Barman A, Marak CM, Barman RM, Sangma CS. Nutraceutical properties of legume seeds and their impact on human health. In: Jimenez-Lopez JC, Clemente A, editors. Legume seed nutraceutical research. IntechOpen; 2019. https://doi.org/10.5772/intechopen.78799</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B23">
    <label>23.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Singhal A, Karaca AC, Tyler R, Nickerson M. Nutraceutical properties of legume seeds and their impact on human health. In: Goyal AK, editor. Grain legumes. IntechOpen; 2016. https://doi.org/10.5772/64020</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Singhal A, Karaca AC, Tyler R, Nickerson M. Nutraceutical properties of legume seeds and their impact on human health. In: Goyal AK, editor. Grain legumes. IntechOpen; 2016. https://doi.org/10.5772/64020</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B24">
    <label>24.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Bondarenko AN. Effect of growth-stimulating preparations on productivity and economic efficiency of chickpea under the conditions of light chestnut saline soils of the Astrakhan oblast’. Agrarian Russia. 2019;(1):24-26. (In Russ.). https://doi.org/10.30906/1999-5636-2019-1-24-26</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Bondarenko AN. Effect of growth-stimulating preparations on productivity and economic efficiency of chickpea under the conditions of light chestnut saline soils of the Astrakhan oblast’. Agrarian Russia. 2019;(1):24-26. (In Russ.). https://doi.org/10.30906/1999-5636-2019-1-24-26</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B25">
    <label>25.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Acquah C, Ohemeng-Boahen G, Power KA, Tosh SM. The effect of processing on bioactive compounds and nutritional qualities of pulses in meeting the sustainable development goal 2. Frontiers in Sustainable Food Systems. 2021;5. https://doi.org/10.3389/fsufs.2021.681662</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Acquah C, Ohemeng-Boahen G, Power KA, Tosh SM. The effect of processing on bioactive compounds and nutritional qualities of pulses in meeting the sustainable development goal 2. Frontiers in Sustainable Food Systems. 2021;5. https://doi.org/10.3389/fsufs.2021.681662</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B26">
    <label>26.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Wang Y, Wang Y, Li K, Bai Y, Li B, Xu W. Effect of high intensity ultrasound on physicochemical, interfacial and gel properties of chickpea protein isolate. LWT. 2020;129. https://doi.org/10.1016/j.lwt.2020.109563</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Wang Y, Wang Y, Li K, Bai Y, Li B, Xu W. Effect of high intensity ultrasound on physicochemical, interfacial and gel properties of chickpea protein isolate. LWT. 2020;129. https://doi.org/10.1016/j.lwt.2020.109563</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B27">
    <label>27.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Пищевая химия: Лабораторный практикум / А. П. Нечаев [и др.] // СПб.: ГИОРД, 2006. 302 с.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Nechaev AP, Traubenberg SE, Kochetkova AA, Nechaev AP. Food chemistry: Laboratory workshop. St. Petersburg: GIORD; 2006. 302 p. (In Russ.).</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B28">
    <label>28.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Скурихин И. М., Тутельян В. А. Руководство по методам анализа качества и безопасности пищевых продуктов. М.: Брандес, Медицина. 1998. 341 с.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Skurikhin IM, Tutelʹyan VA. Guide to methods for food quality and safety analysis. Moscow: Brandes, Meditsina; 1998. 341 p. (In Russ.).</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B29">
    <label>29.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Kolpakova VV, Chumikina LV, Arabova LI, Lukin DN, Topunov AF, Titov YeI. Functional technological properties and electrophoretic composition of modified wheat gluten. Foods and Raw Materials. 2016;4(2):48-57. https://doi.org/10.21179/2308-4057-2016-2-48-57</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Kolpakova VV, Chumikina LV, Arabova LI, Lukin DN, Topunov AF, Titov YeI. Functional technological properties and electrophoretic composition of modified wheat gluten. Foods and Raw Materials. 2016;4(2):48-57. https://doi.org/10.21179/2308-4057-2016-2-48-57</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B30">
    <label>30.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Гаврилин М. В., Попова О. И., Губанова Е. А. Фенольные соединения надземной части шалфея мускатного (Salviasclarea L.), культивируемого в Ставропольском крае // Химия растительного сырья. 2010. № 4. С. 99-104.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Gavrilin MV, Popova OI, Gubanova EA. Phenolic compounds of the aerial part of clary sage (Salviasclarea L.), cultivated in the Stavropol Region. Chemistry of Plant Raw Materials. 2010;(4):99-104. (In Russ.).</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B31">
    <label>31.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Kolpakova VV, Ulanova RV, Kulikov DS, Gulakova VA, Kadieva AT. Grain composites with a complementary amino acid composition in food and fodder. Food Processing: Techniques and Technology. 2019;49(2):301-311. (In Russ.). https://doi.org/10.21603/2074-9414-2019-2-301-311</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Kolpakova VV, Ulanova RV, Kulikov DS, Gulakova VA, Kadieva AT. Grain composites with a complementary amino acid composition in food and fodder. Food Processing: Techniques and Technology. 2019;49(2):301-311. (In Russ.). https://doi.org/10.21603/2074-9414-2019-2-301-311</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B32">
    <label>32.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Kolpakova VV, Chumikina LV, Arabova LI. Modification of functional properties of white and brown rice protein concentrates. Proceedings of the Voronezh State University of Engineering Technologies. 2019;81(1):181-189. (In Russ.). https://doi.org/10.20914/2310-1202-2019-1-181-189</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Kolpakova VV, Chumikina LV, Arabova LI. Modification of functional properties of white and brown rice protein concentrates. Proceedings of the Voronezh State University of Engineering Technologies. 2019;81(1):181-189. (In Russ.). https://doi.org/10.20914/2310-1202-2019-1-181-189</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
  </ref-list>
 </back>
</article>
